联 系 人：宋经理
电 话：15000090958
手 机：15000090958
地 址：上海市闵行区闵北路88弄1-30号第22幢BE156室
邮 编：201107
邮 箱：2541033286@qq.com
阿仪网商铺：http://www.app17.com/c101702/
手机网站：m.xinyuelisa.com
点击次数：754 发布时间：2017/9/15 14:46:08
· 上 传 者： 上海心语生物科技有限公司
· 上传时间：2017/9/15 14:46:08
· 文件大小：11KB
· 文件类型：jpg
· 所属分类：操作维修手册
· 下载次数：351次
· 查看次数：754
· 资料简介：马促卵泡生成激素(FSH)酶联免疫分析试剂盒说明书 l 本试剂盒仅供科研使用。 l 本试剂盒用于体外定量检测马血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中促卵泡生成激素(FSH)的含量。 l 有效期：6个月 l 保存条件：2-8℃ 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马促卵泡生成激素(FSH)水平。用纯化的马促卵泡生成激素(FSH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡生成激素(FSH)，再与HRP标记的促卵泡生成激素(FSH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡生成激素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中马促卵泡生成激素(FSH)浓度。 试剂盒组成 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 R.T. 封板膜 2片（48） 2片（96） R.T. 密封袋 1个 1个 R.T. 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：54 ng/ml 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在、第二孔中分别加标准品100μl，然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为36 ng/ml， 24 ng/ml，12 ng/ml，6 ng/ml，3 ng/ml）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50ul，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50ul，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50ul，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 1. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 2. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 3. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。 4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5. 底物请避光保存。 6. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 7. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 8. 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 试剂盒性能 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。 2.批内与批间应分别小于9%和15%
总访问量：5374572 
